乳能對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能、消化酶活性 和血清生化及免疫指標(biāo)的影響

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凡納濱對(duì)蝦是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖類對(duì)蝦之一，在中國(guó)、臺(tái)灣和東南亞地區(qū)廣泛養(yǎng)殖，但是在其生長(zhǎng)過(guò)程中往往受到各種因素的影響導(dǎo)致產(chǎn)量下降，特別是飼料中由于固醇類物質(zhì)不足，往往不能為其變態(tài)提供充足的蛻皮激素，造成凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)緩慢，健康狀況也受到影響。乳能是山東龍昌動(dòng)物保健品公司生產(chǎn)的20%膽汁酸預(yù)混劑，在對(duì)蝦等甲殼類動(dòng)物飼料中添加可以在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為蛻皮激素，促進(jìn)對(duì)蝦的生長(zhǎng)，另外乳能具有提高機(jī)體免疫力，增強(qiáng)抗病力等作用，本試驗(yàn)以凡納濱對(duì)蝦為研究對(duì)象，觀察對(duì)其生長(zhǎng)性能、消化酶活性、血清生化及免疫指標(biāo)的影響。

1 材料與方法

1.1 地點(diǎn)與時(shí)間

地點(diǎn)：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)室：時(shí)間：2010年7月2日—10月2日。

1.2 供試材料

凡納濱對(duì)蝦：供試凡納濱對(duì)蝦由粵海飼料集團(tuán)有限公司蝦苗廠提供，體重0.30±0.02g。

乳能：山東龍昌動(dòng)物保健品有限公司生產(chǎn)，主要成分為20%膽汁酸。

1.3 試驗(yàn)分組與日糧

400尾凡納濱對(duì)蝦隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中添加700g/t乳能。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)

成分	含量（%）	營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)	含量
魚粉	32	粗蛋白（%）	41.50
豆粕	21	粗脂肪（%）	6.20
花生粕	10	粗灰分（%）	11.50
面粉	20	消化能（KJ/g）	15.50
棉粕	4
蝦殼粉	3
烏賊膏	3
豆油	2
魚油	1
磷酸氫鈣	1
預(yù)混料	3

1.4 飼養(yǎng)管理與采樣

將400尾凡納濱對(duì)蝦隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組，每組200尾，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)40尾，每個(gè)重復(fù)一個(gè)70cm×42cm×20cm水族缸，底層鋪1cm的細(xì)沙，海水經(jīng)6層紗布、1層脫脂棉過(guò)濾，除去有害藻類及浮游生物。水溫波動(dòng)范圍為25—30℃，pH值7.2—7.7。投喂方法采用三日投餌一日停食的投餌方式，并隔日換水量為總量的1/7，停食日清理水體底部污物。

試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)，用紗網(wǎng)隨即取出相應(yīng)數(shù)量的對(duì)蝦，10頭為一組，置于濾紙上吸干體表水分，立即投入盛有海水的燒杯中置于電子分析天平上稱重，然后計(jì)算個(gè)體平均體重。

1.5測(cè)定指標(biāo)

1.5.1 生長(zhǎng)性能

試驗(yàn)開(kāi)始及結(jié)束時(shí)分別對(duì)各水族缸的魚進(jìn)行稱重并記錄其初重（g）及末重（g），計(jì)算其增重及餌料系數(shù)。

飼料系數(shù)(FCR)=總投飼量/（末重－初重）。
1.5.2 脂肪酶活性

從每個(gè)水族缸中隨機(jī)取6尾蝦剝?nèi)⊥暾�肝胰臟，液氮保存，備測(cè)胰脂肪酶酶活性。胰脂肪酶活性使用南京建成科技有限公司試劑盒測(cè)定。

1.5.3生化指標(biāo)
    每個(gè)水族缸中隨機(jī)取6尾蝦，于尾靜脈取血，將所抽取的全血4 ℃放置2h后,于離心機(jī)中8000 r/min、4 ℃離心15 min，取上清為血清，-20℃保存用于測(cè)定堿性磷酸酶（ALP）的。 測(cè)試儀器為日本OLYMPUSAU640全自動(dòng)生化分析儀。
1.5.4 非特異性免疫指標(biāo)
    血清制備同上。超氧化物歧化酶(SOD)及溶菌酶(LSZ)的測(cè)定均采用南京建成生物技術(shù)研究所生產(chǎn)的測(cè)試盒進(jìn)行測(cè)試。
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式中：A——對(duì)照管吸光度；
AW——測(cè)定管吸光度；
V——反應(yīng)液總體積(ml)；
V0——取樣體積(ml)。
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式中：A——測(cè)定管透光度；
A0——空白管透光度；
AW——標(biāo)準(zhǔn)管透光度；
T——標(biāo)準(zhǔn)管濃度；
N——樣本稀釋倍數(shù)。
1.6 數(shù)據(jù)分析
    應(yīng)用SPSS 11.0For Windows進(jìn)行One-Way ANOVA分析，Duncan's法多重比較，數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 乳能對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能的影響

表2 凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能和消化酶指標(biāo)

	對(duì)照組	試驗(yàn)組
數(shù)量（條）	200	200
始重（g）	0.32a	0.31a
末重（g）	15.17a	16.01b
成活率（%）	80.51a	90.12b
餌料系數(shù)	1.48b	1.41a
脂肪酶（U/mg pr.）	14.73a	22.87b

注：同類字母不同者表示差異顯著（p<0.05），下同。

      由上表可以看出，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組末重增加5.54%；成活率提高11.94%；餌料系數(shù)下降4.73%，差異均顯著（p<0.05）。

2.2 乳能對(duì)凡納濱對(duì)蝦胰脂肪酶的影響

表3凡納濱對(duì)蝦胰脂肪酶指標(biāo)

	對(duì)照組	試驗(yàn)組
脂肪酶（U/mg pr.）	14.73a	22.87b

由表3可以看出，與對(duì)照組相比，胰脂肪酶活性呈上升趨勢(shì)，試驗(yàn)組提高55.26，差異顯著（p<0.05）。

2.3 乳能對(duì)凡納濱對(duì)蝦生化指標(biāo)和非特異性免疫指標(biāo)的影響

表4凡納濱對(duì)蝦生化指標(biāo)和非特異性免疫指標(biāo)

	對(duì)照組	試驗(yàn)組
堿性磷酸酶（U/100ml）	2.35a	2.52a
溶菌酶（U/ml）	276.33a	331.68b
超氧化物歧化酶（U）	0.24a	0.28a

由表4可以看出，與對(duì)照組相比，堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶均呈上升趨勢(shì)，但差異不顯著（p＞0.05）；溶菌酶提高20.03%，差異顯著（p<0.05）。

3 討論與結(jié)論

甲殼類動(dòng)物(尤其是蝦類)在其生長(zhǎng)的各階段都需要攝取膽固醇和膽汁酸，在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為蛻皮激素，以保證生長(zhǎng)過(guò)程中的正常蛻皮。作為一種固醇類物質(zhì)，膽汁酸和膽固醇一樣，是蝦蟹等甲殼動(dòng)物正常生長(zhǎng)中不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，由于它們沒(méi)有膽囊和膽汁的分泌，不能提供內(nèi)源性膽汁酸。因此在蝦蟹飼料中添加膽汁酸，能有效地促進(jìn)蝦蟹的變態(tài)和生長(zhǎng)，另外膽汁酸還具有較強(qiáng)的抗應(yīng)激能力，能提高SOD、GSH-Px和GR的水平，提高成活率，保證機(jī)體健康。

本試驗(yàn)以凡納濱對(duì)蝦為研究對(duì)象，通過(guò)試驗(yàn)對(duì)象的增重、餌料系數(shù)和成活率等指標(biāo)來(lái)看，在凡納濱對(duì)蝦日糧中添加700g/t乳能可以顯著提高成活率和增重，降低餌料系數(shù)，增加經(jīng)濟(jì)效益。

消化酶活性的高低是反映水產(chǎn)動(dòng)物消化能力強(qiáng)弱的常用指標(biāo)，消化酶活性在一定程度上反映出機(jī)體對(duì)飼料養(yǎng)分的消化利用程度，機(jī)體生長(zhǎng)于消化酶活性之間存在一定的正向作用關(guān)系。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在凡納濱對(duì)蝦飼料中添加乳能可以提高胰脂肪酶的活性，這與其生長(zhǎng)指標(biāo)變化趨勢(shì)一致。

溶菌酶（LSZ）是魚類非特異性免疫系統(tǒng)的重要組成部分；超氧化物歧化酶（SOD）是重要的抗氧化酶之一，其活性與生物的免疫水平密切相關(guān)；堿性磷酸酶（ALP）不僅與磷代謝密切相關(guān)，而且是重要的解毒體系。因此LSZ 、SOD 和ALP可作為反映動(dòng)物免疫功能的重要生理指標(biāo)。本次試驗(yàn)結(jié)果顯示，凡納濱對(duì)蝦飼料中添加乳能使血清ALP、LSZ和SOD有不同程度的提高，這可能與膽汁酸參與脂肪代謝，促進(jìn)膽汁分泌、保證膽道暢通從而保肝利膽，進(jìn)而起到提高動(dòng)物免疫力有關(guān)。

綜合以上內(nèi)容，在凡納濱對(duì)蝦飼料中添加乳能可以顯著改善其生長(zhǎng)性能，提高脂肪酶活性和機(jī)體免疫力，增強(qiáng)機(jī)體抗病力，保證健康成長(zhǎng)。