凡納濱 對(duì)蝦是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì) 養(yǎng)殖類對(duì)蝦之一,在中國(guó)、臺(tái)灣和東南亞地區(qū)廣泛養(yǎng)殖,但是在其生長(zhǎng)過(guò)程中往往受到各種因素的影響導(dǎo)致產(chǎn)量下降,特別是 飼料中由于固醇類物質(zhì)不足,往往不能為其變態(tài)提供充足的蛻皮激素,造成凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)緩慢,健康狀況也受到影響。乳能是山東龍昌動(dòng)物保健品公司生產(chǎn)的20%膽汁酸預(yù)混劑,在對(duì)蝦等甲殼類動(dòng)物飼料中添加可以在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為蛻皮激素,促進(jìn)對(duì)蝦的生長(zhǎng),另外乳能具有提高機(jī)體免疫力,增強(qiáng)抗病力等作用,本試驗(yàn)以凡納濱對(duì)蝦為研究對(duì)象,觀察對(duì)其生長(zhǎng)性能、消化酶活性、血清生化及免疫指標(biāo)的影響。 1 材料與方法 1.1 地點(diǎn)與時(shí)間 地點(diǎn):華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 水產(chǎn)養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)室:時(shí)間:2010年7月2日—10月2日。 1.2 供試材料 凡納濱對(duì)蝦:供試凡納濱對(duì)蝦由粵海飼料集團(tuán)有限公司蝦苗廠提供,體重0.30±0.02g。 乳能:山東龍昌動(dòng)物保健品有限公司生產(chǎn),主要成分為20%膽汁酸。 1.3 試驗(yàn)分組與日糧 400尾凡納濱對(duì)蝦隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組,對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中添加700g/t乳能。 表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)指標(biāo) | | | | 魚粉 | 32 | 粗蛋白(%) | 41.50 | 豆粕 | 21 | 粗脂肪(%) | 6.20 | 花生粕 | 10 | 粗灰分(%) | 11.50 | 面粉 | 20 | 消化能(KJ/g) | 15.50 | 棉粕 | 4 | | | 蝦殼粉 | 3 | | | 烏賊膏 | 3 | | | 豆油 | 2 | | | 魚油 | 1 | | | 磷酸氫鈣 | 1 | | | | | | |
1.4 飼養(yǎng)管理與采樣 將400尾凡納濱對(duì)蝦隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組,每組200尾,每組5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)40尾,每個(gè)重復(fù)一個(gè)70cm×42cm×20cm水族缸,底層鋪1cm的細(xì)沙,海水經(jīng)6層紗布、1層脫脂棉過(guò)濾,除去有害藻類及浮游生物。水溫波動(dòng)范圍為25—30℃,pH值7.2—7.7。投喂方法采用三日投餌一日停食的投餌方式,并隔日換水量為總量的1/7,停食日清理水體底部污物。 試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí),用紗網(wǎng)隨即取出相應(yīng)數(shù)量的對(duì)蝦,10頭為一組,置于濾紙上吸干體表水分,立即投入盛有海水的燒杯中置于電子分析天平上稱重,然后計(jì)算個(gè)體平均體重。 1.5測(cè)定指標(biāo) 1.5.1 生長(zhǎng)性能 試驗(yàn)開(kāi)始及結(jié)束時(shí)分別對(duì)各水族缸的魚進(jìn)行稱重并記錄其初重(g)及末重(g),計(jì)算其增重及餌料系數(shù)。 飼料系數(shù)(FCR)=總投飼量/(末重-初重)。
1.5.2 脂肪酶活性 從每個(gè)水族缸中隨機(jī)取6尾蝦剝?nèi)⊥暾我扰K,液氮保存,備測(cè)胰脂肪酶酶活性。胰脂肪酶活性使用南京建成科技有限公司試劑盒測(cè)定。 1.5.3生化指標(biāo)
每個(gè)水族缸中隨機(jī)取6尾蝦,于尾靜脈取血,將所抽取的全血4 ℃放置2h后,于離心機(jī)中8000 r/min、4 ℃離心15 min,取上清為血清,-20℃保存用于測(cè)定堿性磷酸酶(ALP)的。 測(cè)試儀器為日本OLYMPUSAU640全自動(dòng)生化分析儀。
1.5.4 非特異性免疫指標(biāo)
血清制備同上。超氧化物歧化酶(SOD)及溶菌酶(LSZ)的測(cè)定均采用南京建成生物技術(shù)研究所生產(chǎn)的測(cè)試盒進(jìn)行測(cè)試。
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式中:A——對(duì)照管吸光度;
AW——測(cè)定管吸光度;
V——反應(yīng)液總體積(ml);
V0——取樣體積(ml)。
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式中:A——測(cè)定管透光度;
A0——空白管透光度;
AW——標(biāo)準(zhǔn)管透光度;
T——標(biāo)準(zhǔn)管濃度;
N——樣本稀釋倍數(shù)。
1.6 數(shù)據(jù)分析
應(yīng)用SPSS 11.0For Windows進(jìn)行One-Way ANOVA分析,Duncan's法多重比較,數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
2 試驗(yàn)結(jié)果 2.1 乳能對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能的影響 表2 凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能和消化酶指標(biāo) | | | 數(shù)量(條) | 200 | 200 | 始重(g) | 0.32a | 0.31a | 末重(g) | 15.17a | 16.01b | 成活率(%) | 80.51a | 90.12b | 餌料系數(shù) | 1.48b | 1.41a | | | |
注:同類字母不同者表示差異顯著(p<0.05),下同。 由上表可以看出,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組末重增加5.54%;成活率提高11.94%;餌料系數(shù)下降4.73%,差異均顯著(p<0.05)。 2.2 乳能對(duì)凡納濱對(duì)蝦胰脂肪酶的影響 表3凡納濱對(duì)蝦胰脂肪酶指標(biāo) 由表3可以看出,與對(duì)照組相比,胰脂肪酶活性呈上升趨勢(shì),試驗(yàn)組提高55.26,差異顯著(p<0.05)。 2.3 乳能對(duì)凡納濱對(duì)蝦生化指標(biāo)和非特異性免疫指標(biāo)的影響 表4凡納濱對(duì)蝦生化指標(biāo)和非特異性免疫指標(biāo) | | | 堿性磷酸酶(U/100ml) | 2.35a | 2.52a | 溶菌酶(U/ml) | 276.33a | 331.68b | | | |
由表4可以看出,與對(duì)照組相比,堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶均呈上升趨勢(shì),但差異不顯著(p>0.05);溶菌酶提高20.03%,差異顯著(p<0.05)。 3 討論與結(jié)論 甲殼類動(dòng)物(尤其是蝦類)在其生長(zhǎng)的各階段都需要攝取膽固醇和膽汁酸,在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為蛻皮激素,以保證生長(zhǎng)過(guò)程中的正常蛻皮。作為一種固醇類物質(zhì),膽汁酸和膽固醇一樣,是蝦蟹等甲殼動(dòng)物正常生長(zhǎng)中不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),由于它們沒(méi)有膽囊和膽汁的分泌,不能提供內(nèi)源性膽汁酸。因此在蝦蟹飼料中添加膽汁酸,能有效地促進(jìn)蝦蟹的變態(tài)和生長(zhǎng),另外膽汁酸還具有較強(qiáng)的抗應(yīng)激能力,能提高SOD、GSH-Px和GR的水平,提高成活率,保證機(jī)體健康。 本試驗(yàn)以凡納濱對(duì)蝦為研究對(duì)象,通過(guò)試驗(yàn)對(duì)象的增重、餌料系數(shù)和成活率等指標(biāo)來(lái)看,在凡納濱對(duì)蝦日糧中添加700g/t乳能可以顯著提高成活率和增重,降低餌料系數(shù),增加經(jīng)濟(jì)效益。 消化酶活性的高低是反映水產(chǎn)動(dòng)物消化能力強(qiáng)弱的常用指標(biāo),消化酶活性在一定程度上反映出機(jī)體對(duì)飼料養(yǎng)分的消化利用程度,機(jī)體生長(zhǎng)于消化酶活性之間存在一定的正向作用關(guān)系。本試驗(yàn)結(jié)果表明,在凡納濱對(duì)蝦飼料中添加乳能可以提高胰脂肪酶的活性,這與其生長(zhǎng)指標(biāo)變化趨勢(shì)一致。 溶菌酶(LSZ)是魚類非特異性免疫系統(tǒng)的重要組成部分;超氧化物歧化酶(SOD)是重要的抗氧化酶之一,其活性與生物的免疫水平密切相關(guān);堿性磷酸酶(ALP)不僅與磷代謝密切相關(guān),而且是重要的解毒體系。因此LSZ 、SOD 和ALP可作為反映動(dòng)物免疫功能的重要生理指標(biāo)。本次試驗(yàn)結(jié)果顯示,凡納濱對(duì)蝦飼料中添加乳能使血清ALP、LSZ和SOD有不同程度的提高,這可能與膽汁酸參與脂肪代謝,促進(jìn)膽汁分泌、保證膽道暢通從而保肝利膽,進(jìn)而起到提高動(dòng)物免疫力有關(guān)。 綜合以上內(nèi)容,在凡納濱對(duì)蝦飼料中添加乳能可以顯著改善其生長(zhǎng)性能,提高脂肪酶活性和機(jī)體免疫力,增強(qiáng)機(jī)體抗病力,保證健康成長(zhǎng)。
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