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酵母培養(yǎng)物對草魚生長性能與腸道粘膜形態(tài)的影響

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    本帖最后由 cjlittlepig 于 2012-6-21 11:33 編輯

    摘自《飼料工業(yè)》
    摘要:為了研究酵母培養(yǎng)物(yeast culture)對草魚生長性能的影響,選取初均重(69.51±6.29g的草魚144 尾,隨機分為3 組,每組3 個重復(fù),每個重復(fù)16 尾魚,分別飼喂基礎(chǔ)飼料和添加1 000 mg/kg2 000 mg/kg 酵母培養(yǎng)物的試驗飼料,經(jīng)過70 d 的池塘網(wǎng)箱養(yǎng)殖試驗,結(jié)果顯示:①與基礎(chǔ)飼料對照組相比,添加酵母培養(yǎng)物能夠提高草魚的特定生長率(SGR),降低飼料系數(shù)(FCR),其中1 000 mg/kg 組與對照組差異顯著(P0.05)。②與對照組相比,各試驗組腸道皺襞高度均顯著高于對照組(P<0.05),粘膜層厚度與皺襞高度表現(xiàn)一致(P<0.05);微絨毛高度、寬度均高于對照組,其中1 000 mg/kg 組微絨毛高度顯著高于對照組(P<0.05),微絨毛密度均高于對照組,其中2 000 mg/kg 組顯著高于對照組(P<0.05)。以上結(jié)果表明:酵母培養(yǎng)物能夠通過改善草魚腸道粘膜形態(tài),促進草魚對飼料的吸收利用,從而促進草魚生長。

    關(guān)鍵詞:酵母培養(yǎng)物;草魚;生長性能;腸道粘膜

        酵母培養(yǎng)物(yeast culture,簡稱YC)通常指用固體或液體培養(yǎng)基經(jīng)酵母菌發(fā)酵的培養(yǎng)物和酵母菌的混合物,含有維生素、礦物質(zhì)、消化酶、促生長因子、有機酸、寡糖、增味物質(zhì)和較豐富的氨基酸等,營養(yǎng)十分豐富,是集營養(yǎng)和保健為一體的飼料添加劑,是生物技術(shù)和微生態(tài)技術(shù)在飼料添加劑中的研究成果之一,具有無殘留、無污染和無毒等優(yōu)點,逐漸成為目前研究的熱點。本試驗通過在草魚基礎(chǔ)飼料中添加不同濃度的酵母培養(yǎng)物,旨在探討酵母培養(yǎng)物對草魚生長性能的影響,為其在草魚飼料中的應(yīng)用提供依據(jù)。

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    試驗材料和方法
    1.1 試驗材料
        酵母培養(yǎng)物由達農(nóng)威生物發(fā)酵工程技術(shù)(深圳)有限公司提供,有效成分是酵母細胞外代謝產(chǎn)物。草魚,由無錫宜興養(yǎng)殖廠提供。
    1.2 試驗設(shè)計及日糧組成
        試驗選取初均重(69.51±6.29g 的草魚144 尾,隨機分為3 組,以基礎(chǔ)飼料作為對照組;在基礎(chǔ)飼料中分別添加1 000、2 000 mg/kg 的酵母培養(yǎng)物作為2個試驗組,共3 個組。每組3 個重復(fù),每個重復(fù)16 尾魚,基礎(chǔ)飼料配方及營養(yǎng)水平見表1。飼料原料經(jīng)微粉碎后過40 目篩,混合均勻后用小型顆粒飼料機加工成直徑1.5 mm 的顆粒飼料備用,飼料加工過程中溫度6570 ℃,持續(xù)時間約1 min。
    1.3 飼養(yǎng)管理
        在50 畝的池塘中設(shè)置網(wǎng)箱進行養(yǎng)殖試驗,網(wǎng)箱規(guī)格為1 m×1 m×1.5 m,本試驗共15 個網(wǎng)箱。試驗魚經(jīng)過2 周的養(yǎng)殖馴化后再進行分組。飼料投喂每天3次,投喂量為體重的2%3%。試驗時間為2008 8月至10 月,飼養(yǎng)期間水質(zhì)條件為:水溫(28.0±3.0)℃、DO8.0 mg/l、pH 值<8.3、亞硝酸鹽<0.01 mg/l、硫化物<0.05 mg/l。正式養(yǎng)殖試驗70 d
    1.4 樣品采集和分析
        飼養(yǎng)試驗結(jié)束后,禁食24 h 后測定每箱魚的總體重和尾數(shù),計算成活率、飼料系數(shù)、特定生長率。解剖試驗魚,取出內(nèi)臟團,分離出腸道,剔除表面脂肪組織,分別取中腸1 cm 左右大小的組織1~2 塊,縱向剖開,使腸粘膜暴露于空氣中,用生理鹽水沖洗3~4 次,除去其上所帶有的血液、糞便等雜質(zhì),制得腸道樣品。掃描電鏡腸道樣品置于4%戊二醛固定液中,超聲波洗滌10 min,更換固定液再次洗滌,更換固定液保存。制樣時將其取出,洗滌,適當(dāng)修剪, 1%鋨酸固定1 h0.1 M pH 7.2 磷酸緩沖液洗3 次,叔丁醇系列梯度脫水,真空干燥,噴金,S-4700 型冷場發(fā)射掃描電鏡觀察、拍照。
        組織切片腸道樣品置于4%中性甲醛中固定、70%乙醇保存。分別經(jīng)濃度為70%、80%90%、95%以及100%的酒精梯度脫水,并置于二甲苯中透明,最后包埋于低熔點石蠟中。使用KD-2508 型切片機橫向連續(xù)切片,厚度為8 μm,而后展片于清潔的載玻片上。采用H.E 染色,中性樹膠封片。顯微測量腸道皺襞高度、寬度,粘膜層、肌層、漿膜層厚度,光學(xué)顯微鏡下觀察并采用Nikon COOLPIX4500 型相機進行拍照。
    1.5 計算公式
    成活率(SR,%)=(試驗?zāi)~尾數(shù)/試驗初魚尾數(shù))×100;
    特定生長率(SGR,%/d)=(ln 末均重-ln 初均重)/飼養(yǎng)天數(shù)×100;
    飼料系數(shù)(FCR)=每箱投喂飼料總量/每箱魚體總增重量。
    1.6 數(shù)據(jù)處理
        試驗數(shù)據(jù)用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示, 結(jié)果采用ExcelSPSS14.0 版統(tǒng)計軟件中One-Way Anova 過程進行方差分析, 并進行Duncan's 法多重比較, 顯著水平為0.05

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    本帖最后由 cjlittlepig 于 2012-6-21 11:34 編輯

    2 結(jié)果
    2.1 酵母培養(yǎng)物對草魚生長性能的影響
        經(jīng)過70 d 的池塘網(wǎng)箱養(yǎng)殖試驗,各組試驗草魚的特定生長率和飼料系數(shù)結(jié)果見表2。各試驗組成活率均為100%,對照組為98%。在特定生長率方面:與對照組相比,各試驗組的特定生長率增加,分別增加了28.72%、4.26%。其中,酵母培養(yǎng)物為1 000 mg/kg組顯著高于對照組(P<0.05)。在飼料系數(shù)方面:與對照組相比,各試驗組飼料系數(shù)分別下降了33.76%、10.55%,其中1 000 mg/kg 組飼料系數(shù)顯著低于對照組(P<0.05)。
    2.2 酵母培養(yǎng)物對草魚腸道粘膜形態(tài)的影響
    2.2.1 腸道皺襞觀察及測量
        各組草魚腸道皺襞測量結(jié)果見表3,各試驗組皺襞高度均顯著高于對照組(P<0.05),粘膜層厚度與皺襞高度表現(xiàn)一致(P<0.05)。各試驗組皺襞寬度、肌層厚度、漿膜層厚度均與對照組差異不顯著(P>0.05)。
    2.2.2 腸道微絨毛觀察及測量
        腸道微絨毛觀察結(jié)果見表4,各試驗組微絨毛高度均高于對照組,其中1 000 mg/kg 組顯著高于對照組(P<0.05)。各試驗組微絨毛寬度均高于對照組,但差異不顯著(P>0.05),微絨毛密度均高于對照組,其中2 000 mg/kg 組顯著高于對照組(P<0.05)。



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         本試驗中,各試驗組特定生長率比對照組分別增加了28.72%、4.26%,飼料系數(shù)與對照組相比,下降了10%以上,其中1 000 mg/kg 組下降了33.76%。此結(jié)果表明,酵母培養(yǎng)物在一定范圍內(nèi)可有效促進草魚的生長,降低飼料系數(shù),且酵母培養(yǎng)物1 000 mg/kg 組生長效果最好。此結(jié)果可能由于酵母培養(yǎng)物中甘露寡糖成分促進了腸道中雙歧桿菌、乳酸桿菌等有益菌的生長,阻止了致病菌的入侵,維持了腸道菌群的平衡,并且改善了腸道粘膜形態(tài);營養(yǎng)物質(zhì)成分為草魚生長提供了營養(yǎng)物質(zhì),參與機體代謝,還有各種未知生長因子共同作用,從而促進草魚的生長。這與劉哲等研究酵母培養(yǎng)物(YC)添加量為5%時,明顯促進了建鯉生長的結(jié)果;吳新民等在對蝦飼料中添加活性酵母可提高飼料利用率的結(jié)果一致。

        YC 對粘膜的保護作用可能部分與酵母細胞壁有關(guān)。而酵母細胞壁甘露寡糖不經(jīng)消化直接到達后腸促進雙歧桿菌和乳酸桿菌增殖,并且與病原菌在腸壁上的受體非常相似,可吸附病原菌,減少了絨毛與抗原的結(jié)合機會,改善腸道微生物區(qū)系,進而影響腸道形態(tài)。Zhang 等證實,酵母細胞壁改善了肉仔雞的腸粘膜形態(tài)。有報道YC 對家禽粘膜形態(tài)也有影響家禽日糧中添加酵母細胞或酵母細胞壁,能提高絨毛高度和絨毛高度與隱窩深度比[6]。本試驗結(jié)果顯示,各試驗組皺襞高度均顯著高于對照組,各試驗組肌層厚度均高于對照組,消化管壁肌肉的厚度決定食糜的機械消化速率。這與劉觀忠報道的YC 增加了腸壁厚度的結(jié)果一致。各試驗組微絨毛高度均高于對照組,其中1 000 mg/kg 組顯著高于對照組。各試驗組微絨毛寬度、密度均高于對照組。此結(jié)果表明,基礎(chǔ)飼料中添加1 000 mg/kg 酵母培養(yǎng)物能夠促進草魚腸道皺襞、微絨毛發(fā)育、生長,從而使腸粘膜形態(tài)得到改善,且與提高其平均日增重和降低飼料系數(shù)的試驗結(jié)果相一致?赡苁且驗閅C 到達消化道內(nèi)能分泌并活化大量蛋白酶,促進飼料蛋白的降解;也可能是酵母細胞壁某些成分促進了消化道的發(fā)育,改善了腸道內(nèi)環(huán)境。劉觀忠等研究發(fā)現(xiàn)酵母培養(yǎng)物具有改善雛雞腸壁結(jié)構(gòu)的效果。李順等發(fā)現(xiàn),活性酵母可替代抗生素,有促進仔豬生長和降低腹瀉的作用,并可改善小腸上皮組織結(jié)構(gòu)。胡友軍等研究發(fā)現(xiàn),添加活性酵母顯著提高了仔豬腸道絨毛高度,一定程度上克服了斷奶應(yīng)激對腸道造成的損傷,這些與本試驗研究結(jié)果相似。關(guān)于酵母對腸道的保護作用的機制尚需進一步研究。

        有報道隨著活酵母飼料添加水平的升高,肉仔雞生長速度和飼料利用率有隨之減少的趨勢,當(dāng)YC 添加水平達到0.9%時反而對肉雞生長有抑制作用,劉觀忠也有類似報道。本文研究的添加2 000 mg/kg酵母培養(yǎng)物,特定生長率有下降的趨勢且飼料系數(shù)有所增加,因此,高濃度添加酵母培養(yǎng)物并不能使草魚的生產(chǎn)性能進一步改善,與他們的報道一致?赡苡捎谶^高劑量YC 引起的免疫反應(yīng)過度,使用于生長的量或營養(yǎng)素減少,具體原因有待進一步證明。

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