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[每周一例] 腦膜炎敗血黃桿菌引起牛蛙發(fā)病一例

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[病例318]
      福建漳州詔安縣一牛蛙養(yǎng)殖場,土池淺水養(yǎng)殖牛蛙(如圖1),平均每個池塘15~20平方米,放養(yǎng)密度100~120只/ 平方米。

       2012年3月份開始上料以后就逐漸有發(fā)病,初期主要是內(nèi)臟出現(xiàn)“套腸”,當(dāng)時用抗生素后死亡下降,但沒有根治,之后出現(xiàn)白內(nèi)障、歪頭、爛頭、打轉(zhuǎn)等癥狀。死亡時四腳伸直,身體僵硬。

       2012年8月13日到場調(diào)查,在池塘中見大量歪頭、爛頭的牛蛙(見圖2、圖3),從塘中分別取出2只歪頭、2只爛頭以及2只無明顯疾病癥狀的牛蛙。外觀歪頭的牛蛙患有白內(nèi)障(見圖4),解剖見牛蛙具有“套腸”癥狀(見圖5),其中爛頭的牛蛙腹腔有大量腹水(見圖6)。兩只正常牛蛙無明顯病變。分別從所取牛蛙的腦、肝臟、心臟、肌肉以及腹水中接種,普通營養(yǎng)瓊脂進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng),并取肝、脾、腎、腦、腸和眼等組織分別用95%酒精和波恩氏固定液固定進(jìn)行病毒檢測和組織病理切片觀察。

       結(jié)果:從歪頭的牛蛙(NW-1)和爛頭的牛蛙(NW-3)中分離出兩株細(xì)菌(見圖7),經(jīng)過16S rDNA測序鑒定都為腦膜炎敗血黃桿菌(見圖8),病毒檢測結(jié)果顯示,所采6只牛蛙的組織(見圖9),PCR檢測均能擴(kuò)增出與預(yù)期片段大。ㄍ芎绮什《緳z測引物為545bp)相符的目的片段,將目的片段純化后測序,序列經(jīng)NCBI比對,其與GenBank中蛙虹彩病毒序列同源性為99.4%,因此可判定牛蛙感染蛙虹彩病毒。組織病理切片觀察顯示肝臟嚴(yán)重水變性(見圖10),腎臟腎小管腫脹(見圖11),其它組織均正常。

       分析:1、腦膜炎敗血黃桿菌也稱為腦膜膿毒性金黃桿菌,可以引起人類腦膜炎等疾病,在蛙類也有較多致病報告,張奇亞等(1999)在“旋游癥”美國青蛙腦組織分離到該菌,周永燦等(2001)在白內(nèi)障和歪脖子虎紋蛙的眼、血、肝、腦、腹水分離到該菌,陳耀明等(1994)在發(fā)病牛蛙的肝臟和腹水中分離到該菌,葉雪平等(1996)在歪脖子的牛蛙腦部分離到該菌。本病例從患病牛蛙腦部也分離到該菌,發(fā)病牛蛙具有典型的歪頭、白內(nèi)障、共濟(jì)失調(diào)等典型的蛙腦膜炎的癥狀。

       2、據(jù)A. Cunningham(2008)蛙感染虹彩病毒后主要表現(xiàn)兩個發(fā)病癥狀:皮膚潰瘍和全身性出血。本病例中所采6只牛蛙均能檢測出蛙虹彩病毒,很多發(fā)病蛙頭部皮膚局部脫落腐爛,因此蛙虹彩病毒在本病例中可能也起到了一定的致病作用。(利洋研究所 雷燕 戚瑞榮 利洋技術(shù)部 唐紹林提供 2015.01.29)

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